AcidiFluor™ Series
[エンドサイトーシス検出用蛍光プローブ]
570-590 nm：橙色
AcidiFluor ORANGE-Dextranは酸性環境を検出する蛍光プローブの AcidiFluor ORANGEで標識したデキストランです。デキストランは細胞膜透過性のない水溶性多糖類で、エンドサイトーシスの検出に広く用いられています。また、AcidiFluor ORANGE は中性でほとんど蛍光を示さず、酸性で強い蛍光を示す蛍光プローブです。そのためエンドサイトーシスされた小胞が細胞内で酸性化されると明瞭な蛍光を示します。
エンドサイトーシスの検出には一般的に 10 kDa のデキストランが使われます。一方、分子量 70 kDa のデキストランは一般的なエンドサイトーシスではほとんど取り込まれず、マクロピノサイトーシスと呼ばれる特殊なエンドサイトーシスで細胞に取り込まれることが知られています。
これらのことから、 AcidiFluor ORANGE-Dextran 10k, 70kは、それぞれエンドソーム、マクロピノソームの酸性化の検出に使用できます。
| 型番 | 製品名 | 容量 | 希望小売価格（税抜価格） |
|---|---|---|---|
| GC306 | AcidiFluor™ ORANGE-Dextran 10k | 1 mg | ￥ 69,800 |
| AR0312-J1 | AcidiFluor™ ORANGE-Dextran 70k | 1 mg | ￥ 69,800 |
AcidiFluor™ ORANGE-Dextran 10k, 70k
製品情報
印刷する
| 名称 | 検出対象 | 反応 | pKa |
Absmax (nm) | FLmax (nm) | ε | Φ |
| AcidiFluor ORANGE-NHS | pH | 可逆 | 5.3, 6.8 | 544 | 565 | 80,000 | 0.7 |
AcidiFluor™ ORANGE-Dextran 10k, 70k
AcidiFluor ORANGE-Dextran 10k および 70k による細胞イメージング例
印刷する
HeLa 細胞に取り込まれた AcidiFluor ORANGE-Dextran 10k のライブセルイメージング。HeLa 細胞を 0.2 mg/mL AcidiFluor ORANGE-Dextran 10kを含む培地で 4 時間培養後に蛍光顕微鏡で観察したもの。画像は蛍光像と微分干渉像の重ね合わせで、オレンジの疑似カラーは、ex. 530－560 nm, em. 573－647 nm で撮影した AcidiFluor ORANGE の蛍光像、グレーの疑似カラーは微分干渉像。スケールバーは 50 µm。
HeLa 細胞に取り込まれた AcidiFluor ORANGE-Dextran 70k のライブセルイメージング。HeLa 細胞を 0.2 mg/mL AcidiFluor ORANGE-Dextran 70kを含む培地で 4 時間培養後に蛍光顕微鏡で観察したもの。画像は蛍光像と DIC の重ね合わせで、オレンジの疑似カラーは、ex. 530－560 nm, em. 573－647 nm で撮影した AcidiFluor ORANGE の蛍光像、グレーの疑似カラーは DIC 画像を示す。スケールバーは 50 µm。
基本的には固定細胞では使用できません。リソソームやエンドソームの酸性 pH は生きている細胞の活性によって酸性 pH が保たれており、固定により死んだ細胞ではその酸性が維持されなくなるためです。
ただし、リソソームに局在する AcidiFluor ORANGE、抗体などを標識した AcidiFluor-NHS や HaloTag に結合した HaloTag AcidiFluor ORANGE ligand の局在を知る目的で、固定後速やかに酸性 pH バッファーに置換して蛍光を確認することは可能と考えられます。
解決しない場合、製品に関するお問い合わせフォームをご利用ください。
D. Asanuma, Y. Takaoka, S. Namiki, K. Takikawa, M. Kamiya, T. Nagano, Y. Urano, K. Hirose (2014)
Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 53: 6085-6089 DOI:10.1002/anie.201402030
M. Isa, D. Asanuma, S. Namiki, K. Kumagai, H. Kojima, T. Okabe, T. Nagano, K. Hirose (2014)
ACS. Chem. Biol. 9: 2237-2241 DOI:10.1021/cb500654q
R. Watanabe, N. Soga, D. Fujita, K. V. Tabata, L. Yamauchi, S. H. Kim, D. Asanuma, M. Kamiya, Y. Urano, H. Suga, H. Noji (2014)
Nat. Commun. 5: 4519 DOI:10.1038/ncomms5519
メールでのお問い合わせ