- ヒトiPS細胞・ヒトES細胞と分化細胞を識別可能
- フローサイトメトリーや、ライブセルイメージングが可能
- 染色状態で培養可能
Kyoto Probe 1 (KP-1)は Merck KGaA (Darmstadt, Germany) からも全世界にて
SCT 029 BioTracker™ 529 Green Pluripotent Stem Cell Dye の名前で販売されています。
StemFluor™ Series
Kyoto Probe 1 (KP-1)
[ヒト幹細胞（iPS/ES 細胞）検出用プローブ]
495-540 nm：緑色
価格
| 型番 | 製品名 | 容量 | 希望小売価格（税抜価格） |
|---|---|---|---|
| GC7001-01 | Kyoto Probe 1 (KP-1) | 10 μg × 5 | ￥ 39,800 |
| GC7001-02 | Kyoto Probe 1 (KP-1) | 10 μg × 10 | ￥ 69,800 |
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製品情報
Kyoto Probe 1 (KP-1)
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KP-1 の物性
名称 膜透過性
Absmax (nm) FLmax (nm) Φ Kyoto Probe 1 (KP-1) あり 515 529 0.45 吸収、蛍光スペクトル
KP-1の蛍光特性
スペクトルは、(N. Hirata et al. 2014 Cell Rep. 6: 1165-1174) より引用 -
KP-1 による染色例およびそのメカニズム
Kyoto Probe 1 (KP-1)
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KP-1 による染色例およびそのメカニズム
ヒト iPS 細胞の染色例
フィーダー細胞上のヒト iPS 細胞のコロニーを KP-1 で蛍光染色した写真。(左: 明視野像、右: 蛍光像、スケールバー: 300 μm) (Hirata, N. et al. 2014 Cell Rep.6: 1165-1174 より引用)
KP-1 によるヒトiPS/ES細胞への特異的染色のメカニズム
KP-1 は細胞膜透過性のある蛍光色素で、細胞に添加すると膜内に取り込まれます。しかし、分化細胞では ABC トランスポーターの ABCB1 および ABCG2 の作用で細胞外に排出されるため、分化した細胞は染色されません。一方、ヒト由来の幹細胞ではこれらのトランスポーターの発現が少ないため、KP-1 が細胞外へ排出されずにミトコンドリアに蓄積します。その結果、KP-1 の濃度がヒト幹細胞内では高く、分化細胞では低くなるため蛍光強度の差が生じると考えられます。（N. Hirata, et al., 2014, Cell Rep. 6: 1165-1174）
ヒト ES 細胞の染色例
ヒト iPS 細胞 (C, F) と同様に ES 細胞 (D, G) も染色されます。部分的に分化した細胞塊では染色される部分が減っています（E, H)。(Hirata, N. et al. 2014 Cell Rep. 6: 1165-1174 より引用)
よくあるご質問
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Q KP-1 に細胞毒性はありませんか？A
顕著な細胞毒性は観察されていません。正確な評価を行ったわけではありませんが、1 μM KP-1 存在下で 48 時間培養しても、細胞の様子に変化は見られませんでした。
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Q KP-1 はマウス ES 細胞に使えますか？A
ヒト未分化細胞では ABC トランスポーターのうち ABCB1 および ABCG2 の発現が少ないため、細胞に取り込まれた KP-1 が細胞内から排出されないことにより、未分化細胞のみを染色します。マウスを含む他の動物ではこの ABC トランスポーターの発現プロファイルが異なることが知られているため、期待通りの染色パターンが得られない可能性があります。ヒト以外の幹細胞に応用を検討される場合は、事前に十分ご検討いただくことをお勧めしております。
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Q Q&A を見ても問題が解決しませんA
蛍光色素一般に関する Q&A も参照してください
参考文献
C. Miyagi‑Shiohira, I. Saitoh, M. Watanabe, H. Noguchi (2020)
Sci. Rep. 10:18084 DOI: 10.1038/s41598-020-75016-6
D. Mao, S. Ando, S. Sato, Y. Qin, N. Hirata, Y. Katsuda, E. Kawase, T. F. Kuo, I. Minami, Y. Shiba, K. Ueda, N. Nakatsuji, M. Uesugi (2017)
Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 56: 1765-1770 DOI:10.1002/anie.201610284
T. F. Kuo, D. Mao, N. Hirata, B. Khambu, Y. Kimura, E. Kawase, H. Shimogawa, M. Ojika, N. Nakatsuji, K. Ueda, M. Uesugi (2014)
J. Am. Chem. Soc. 136: 9798-9801 DOI:10.1021/ja501795c
N. Hirata, M. Nakagawa, Y. Fujibayashi, K. Yamauchi, A. Murata, I. Minami, M. Tomioka, T. Kondo, T. F. Kuo, H. Endo, H. Inoue, S. Sato, S. Ando, Y. Kawazoe, K. Aiba, K. Nagata, E. Kawase, Y. T. Chang, H. Suemori, K. Eto, H. Nakauchi, S. Yamanaka, N. Nakatsuji, K. Ueda, M. Uesugi (2014)
Cell Rep. 6: 1165-1174 DOI:10.1016/j.celrep.2014.02.006
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