AcidiFluor™ ORANGE-NHS

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¥49,800¥79,800

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型番 製品名 標識部位 容量 希望小売価格(円)
GC302 AcidiFluor ORANGE™-NHS NHS-ester 1 mg ¥79,800
GC303 5 回分 ¥49,800
  • 混ぜるだけ
  • S/N比が高い
  • タンパク質標識後も高いpH応答性

AcidiFluor™ ORANGE-NHSは、酸性環境下で蛍光が大幅に増大するプローブAcidiFluor™ ORANGEに、アミノ基への標識部位を加えたタンパク質・核酸標識用pHプローブです。N-ヒドロキシスクシンイミドエステル(NHS)を介して、抗体やタンパク質等アミノ基を有する分子と混合するだけで安定な共有結合を形成します。
本製品は局所環境下でのpHモニタリングやエンドサイトーシス・エキソサイトーシスの検出などに最適です。

AcidiFluor™ ORANGE-NHSはタンパク質に標識した後も優れた選択性を持って酸性環境を検出し、酸性オルガネラ内の環境に相当するpH 5.0では、生理的pH 7.4と比較して蛍光強度は10倍以上増大します。また、励起光照射に伴う光褪色に対しても優れた耐性を示します。

544 nm での励起により、オレンジ色蛍光を発するため、CFP、Hoechst等の青色蛍光やGFPなどの緑色蛍光、近赤外蛍光と組み合わせたマルチカラーイメージングに使用可能です。
さらにイメージングだけではなく、プレートリーダーを用いて、化合物の取り込み等をハイスループットスクリーニングにより評価することが可能です。

図1. AcidiFluor™ ORANGE-NHSと抗体の反応

AcidiFluor™ ORANGE-NHSの特長

λabs 544 nm

λfl 565 nm

pKa 5.3, 6.8

ε 80,000

S/N比が高い


図2. AcidiFluor™ ORANGE-NHSと他社pHプローブとのpH応答比較

pH 5 および7.4のリン酸緩衝液中(0.1 M)で、各pHプローブのNHS体およびBSA標識体の蛍光強度を比較した。pH 5.0におけるAcidiFluor™ ORANGE-NHSの蛍光強度はpH 7.4と比較して、約20倍に増大した。一方、pHrodo™ Red-NHS体 (Life Technology社) は約1.8倍、CypHer™ 5E-NHS体 (GE Healthcare) は約7.5倍であり、AcidiFluor™ ORANGE-NHSがより鋭敏に酸性pHを捉えた。同様にBSA標識体の測定結果から、標識後のpH応答性はAcidiFluor™ ORANGEのみで高く維持されることが示された。

AcidiFluor™ ORANGE-NHS : λex 532 nm / λem 568 nm
pHrodo™ Red-NHS (Life Technology社) : λex 560nm / /λem 582 nm
CypHer™ 5E-NHS (GE Healthcare社) : λex 644 nm / /λem 667 nm

図3. 細胞内の箇所を選択し、経時的な蛍光強度をグラフ化した。AcidiFluor™ ORANGE-BSAは、細胞に取り込まれると経時的に蛍光強度が上昇したが、pHrodo-BSA、CypHer5E-BSAは、蛍光強度変化は観察されなかった。

参考文献

M. Ishikawa, R. Mashiba, K. Kawakatsu, N. K. Tran, T. Nishikata (2018)
Macrophage 5: e1627

R. Mashiba, M. Ishikawa, Y. Sumiya, K. Kawakatsu, N. K. Tran, T. Nishikata (2018)
Anticancer Res. 38: 4295-4298 DOI:10.21873/anticanres.12727

A. Hayashi, D. Asanuma, M. Kamiya, Y. Urano, S. Okabe (2016)
Neuropharmacology 100: 66-75 DOI:10.1016/j.neuropharm.2015.07.026

D. Asanuma, Y. Takaoka, S. Namiki, K. Takikawa, M. Kamiya, T. Nagano, Y. Urano, K. Hirose (2014)
Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 53: 6085-6089 DOI:10.1002/anie.201402030

M. Isa, D. Asanuma, S. Namiki, K. Kumagai, H. Kojima, T. Okabe, T. Nagano, K. Hirose (2014)
ACS. Chem. Biol. 9: 2237-2241 DOI:10.1021/cb500654q

R. Watanabe, N. Soga, D. Fujita, K. V. Tabata, L. Yamauchi, S. H. Kim, D. Asanuma, M. Kamiya, Y. Urano, H. Suga, H. Noji (2014)
Nat. Commun. 5, Article number: 4519 DOI:10.1038/ncomms5519

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AcidiFluor™ ORANGE-NHS - BSA標識体のHeLa細胞によるエンドサイトーシス観察

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