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    • CopperGREEN™

      $49,800

      当ページに掲載している製品・サービスに関し、ご購入希望ならびご興味のある方は、こちらまでお問い合わせください。 型番 名称 容量 希望小売価格(円) GC 902 CopperGREEN™ 50 nmol × 5 ¥49,800 銅はチトクロームc や superoxide dismutase (SOD)などの酵素活性に必要な生体中の微量元素です。CopperGREEN は、銅イオンの中でも、細胞中の還元環境下のCuI イオンを特異的に検出する蛍光試薬です。ライブセルイメージングにお使いいただけます。 CopperGREEN の特長 高い特異性 生体中の微量金属の中でも還元された銅イオン(CuI)のみを特異的に検出するユニークな蛍光プローブです。 CuII イオンやマンガン(MnII)、コバルト(CoII)、ニッケル(NiII)、鉄(FeII)、亜鉛(ZnII)の各イオンでは蛍光強度は増加しません S/N が高い CuI と反応すると、100倍以上の蛍光強度増大が観察されます。 測定原理 CopperGREEN はほとんど無色、無蛍光の物質ですが、CuI イオンをキレートしたのちに分解・酸化され、緑色の蛍光物質(Exmax~480 nm Emmax=510 nm)に非可逆的に変化します。そのためマイルドな固定を行っても蛍光は保持されます。 CopperGREENの反応性 図1. さまざまな金属イオンおよび活性酸素種 (ROS) に対するCopperGREENの反応性 銅 (I) イオン存在下でのみ、CopperGREEN の顕著な蛍光増大が起こります。 1 μM CopperGREEN を溶解したHEPESバッファー (0.05 M, pH 7.2, コソルベントとして0.1 % DMSOを含む)に、各金属イオン(20 μM)と2 mM グルタチオン、または下記の活性酸素種生成系を添加。37℃で120分反応後に蛍光強度を測定。ただし、CuII はグルタチオンを含まない。 励起波長470 nm、測定波長510 nmの蛍光強度をTECAN Infinite M200マイクロプレートリーダーを用いて、励起バンド幅 9 nm、蛍光バンド幅 20 nm で計測。 活性酸素種生成条件 H2O2: 300 µM H2O2 OCl-: 300 µM NaOCl ・OH: 20 µM Fe(ClO4)2, 200 µM H2O2 none: 0.05 M HEPES buffer (pH 7.2) as a control. CopperGREENの蛍光スペクトルおよび反応特性   図2. CopperGREEN のスペクトルおよび反応特性 (左)CopperGREEN のスペクトル変化。 CuI との反応により、510 nmを最大とする蛍光強度が増大する。(右)1 μM CopperGREEN と CuI との反応特性。ほぼモル比1:1で反応し、およそ90分で反応はほぼ飽和に達する。 (左)5 μM CopperGREENと CuI の反応前、反応後の蛍光スペクトルをHITACHI F-2700 分光蛍光光度計でスリット幅 2.5 nm, フォトマル電圧 700V にて測定。100 μM [CuI(CH3CN)4]PF6 , 50 mM HEPESバッファー (pH 7.2), 2 mM glutathione, コソルベントとして0.5 % DMSOを含む溶液中で37℃、2時間反応させた。 (右上) [CuI(CH3CN)4]PF6 濃度に応じた1 μM CopperGREENの蛍光強度変化。励起波長470 nm、測定波長510 nmの蛍光強度をTECAN Infinite M200 Pro マイクロプレートリーダーで、励起バンド幅 9 nm、蛍光バンド幅 20 nm で計測。50 mM HEPESバッファー (pH 7.2), 2 mM グルタチオンとコソルベントとして0.1 % DMSOを含む溶液で測定。 (右下)1 μM CopperGREENと 100 μM [CuI(CH3CN)4]PF6 との反応の時間経過。励起波長470 nm、測定波長510 nmの蛍光強度をHITACHI F-2700 分光蛍光光度計でスリット幅 5 nm, フォトマル電圧 700V にて計測。 細胞イメージング例 CopperGREENで細胞に取り込ませた銅をイメージングできます。 写真は微分干渉像にCopperGREEN の蛍光シグナル(緑)を重ね合わせたもの。200 μMの CuCl2 を含む DMEM(+8% FBS, P.S.)中で一晩培養して銅を取り込ませたHeLa 細胞を 200 μM EDTA を含む PBS で洗浄して細胞外の銅イオンを取り除き、5 μM CopperGREEN を含む培地で3時間染色しました。 ライソソーム中での CopperGREEN の分解を防ぎ、より高いコントラストを得るために、染色30分前から染色中は培地に 10 mM NH4Clまたは 100 nM bafilomycin A1の添加をお勧めします。(上記写真では、10 mM NH4Cl を添加しています。)また、観察時は HBSS などフェノールレッドを含まないバッファーに置き換える必要があります。蛍光観察には GFP 用などの一般的な B 励起フィルターが使用できます。 参考文献 Masayasu Taki, Shohei Iyoshi, Akio Ojida, Itaru Hamachi, Yukio Yamamoto J. Am. Chem. Soc., 2010, 132, 5938–5939 doi: 10.1021/ja100714p

    • D-Luciferin potassium salt(High Purity)

      $0$99,800

      当ページに掲載している製品・サービスに関し、ご購入希望ならびご興味のある方は、こちらまでお問い合わせください。 型番 製品名 容量 希望小売価格(円) IM207 D-Luciferin potassium salt(High Purity) 1g ¥99,800 IM208 D-Luciferin potassium salt(High Purity) 5g お問い合わせ Firefly Luciferin Material Amount Storage Stability Firefly Luciferin 1 g -20 °C Desiccate Protect from light When stored as directed, reactive probes are stable for at least 6 months 5 g 1 g is enough for 300 mice General Specifications  Color:  Light yellow powder  Detection Method: Bioluminescence Excitation Class: Visible  Molecular Weight: 280.32 g.mol-1 Formula: C11H8N2O3S2 Cas Number: 2591-17-5  Shipping Condition: Dry Ice  Regulatory Statement: For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.  Description Luciferin is a small molecule that consists of a benzothiazole moiety attached to a thiazole carboxylic acid moiety. Luciferin is a natural substrate of luciferase, an enzyme found in Firefly luciferase. This molecule has fluorescent properties (Ex 328 nm; Em 532 nm in H2O)1,2 but it is mainly used for bioluminescent imaging (BLI) purpose. Bioluminescence is a natural process that has been found in various living organisms such as the North American firefly (Photinus pyralis) and is based on the oxidation of D-luciferin catalyzed by the enzyme Luciferase. Upon recognition by the enzyme, D-luciferin is oxidized to oxy-luciferin and releasing one photon of light, which can be detected by a CCD camera (Figure 1). The intensity of the light output is closely related to the amount of D-luciferin available for the enzyme and therefore it is possible to quantify the amount of luciferin by measuring the amount of emitted light with a CCD camera. As a non-invasive imaging method, BLI is comparable to other in vitro and in vivo techniques but has the advantage of high sensitivity, convenience and ease of use. It does not require a light source (as opposed to fluorescence) and there is no background signal from tissues that do not express luciferase. Moreover, it allows real-time imaging of luciferase expressing cells or luciferase expressing mice.3-5 The luciferin/Luciferase process is very substrate dependent and does not allow significant modification on the luciferin scaffold to be recognized by the enzyme. Figure 1: Oxydation of D-luciferin by Firefly luciferase forming oxy-luciferin and a photon of light Guideline for use  D-luciferin for in vitro use: – 1g of D-luciferin is dissolved in 33.3 mL of sterile water to make a 30 mg/mL stock solution. After mixing and filtering (0.2 um), the solution is aliquoted and purged with nitrogen (inert gas prevents oxidation) protect from light and freeze down to -80°C for future use. Frozen stock solutions can be stored up to 1 year. – D-luciferin stock solution is thawed, kept on ice and protected from light. Stock solution is diluted at 1:200 in complete culture medium to 150 ug/mL. Luciferase expressing cells are incubated 5 min at 37°C prior to imaging. Diluted solution should be discarded after use. D-luciferin for in vivo use: – 1g of D-luciferin is dissolved in 66.6 mL of DPBS, w/o Mg2+ and Ca2+ to make a 15mg/mL solution. After mixing and filtering, the solution is aliquoted and purged with nitrogen (inert gas prevents oxidation) protect from light and freeze down to -80°C for future use. Frozen stock solution can be stored up to 1 year. – D-luciferin solution is thawed, kept on ice and protected from light. Diluted solution should be discarded after use – Mouse is injected IP with D-luciferin solution at 150mg/kg of body weight. Image are acquired after 10-15 min post-injection. References:  1. White, E.H. et al.,(1963) J. Am. Chem. Soc., 85, 337 2. Bowie, L.J., (1978) Methods in Enzymology, 57, 23 3. Prescher, J. A., and Contag, C. H. (2010) Curr. Opin. Chem. Biol. 14, 80-89. 4. McCaffrey, A., Kay, M. A., and Contag, C. H. (2003) Mol. Imaging 2, 75-86 5. Massoud, T. F., and Gambhir, S. S. (2003) Genes Dev. 17, 545-580.  希望小売価格

    • Diaminofluorescein-2 (DAF-2)

      $30,000

      当ページに掲載している製品・サービスに関し、ご購入希望ならびご興味のある方は、こちらまでお問い合わせください。 型番 製品名 容量 希望小売価格(円 ) SK1001-01 Diaminofluorescein-2(DAF-2) 1mg ¥30,000 Diaminofluorescein-2(DAF-2)の特長 組織や培養細胞が生成するNOをリアルタイムに観察できます。 可視光励起なので、生体成分由来の蛍光の影響が少なくてすみます。 可視光励起なので、細胞にダメージを与えません。 中性条件でNOを捉え蛍光を発するので、pHを変えずに測定できます。 高感度かつ特異的に測定できます。 測定原理 DAF-2のアミノ基がNOと反応し、励起波長495nmで励起すると波長515nmの緑色の蛍光を発します。 内容 DAF-2 1mg(DMSO 0.55mL中) C20H14N2O5 分子量:362.3 試薬の調製例 本品は約5mmol/Lになっております。 使用時に中性のバッファー等で500倍程度に希釈してお使いください。 参考文献 Masaki Matsuoka, Ashutosh Kumar, Muhammad Muddassar, Akihisa Matsuyama, Minoru Yoshida, and Kam Y. J. Zhang  (2017) J. Chem. Inf. Model., 57:203–213, DOI: 10.1021/acs.jcim.6b00649 Giuseppe Pezzotti, Elia Marin, Tetsuya Adachi, Alfredo Rondinella,Francesco Boschetto, Wenliang Zhu, Nobuhiko Sugano, Ryan M. Bock,Bryan McEntire & Sonny B. Bal (2017) Scientific Reports 7:44848 Miller EW, Chang CJ. Curr Opin Chem Biol. 2007 Dec;11(6):620-5. Epub 2007 Nov 9. Bryan NS, Grisham MB. Free Radic Biol Med. 2007 Sep 1;43(5):645-57. Epub 2007 Apr 29. Doctor A, Platt R, Sheram ML, Eischeid A, McMahon T, Maxey T, Doherty J, Axelrod M, Kline J, Gurka M, Gow A, Gaston B. Proc Natl Acad Sci U S A. 2005 Apr 19;102(16):5709-14. Epub 2005 Apr 11. Tarpey MM, Wink DA, Grisham MB. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2004 Mar;286(3):R431-44. Speyer CL, Neff TA, Warner RL, Guo RF, Sarma JV, Riedemann NC, Murphy ME, Murphy HS, Ward PA.  Am J Pathol. 2003 Dec;163(6):2319-28. Lebuffe G, Schumacker PT, Shao ZH, Anderson T, Iwase H, Vanden Hoek TL. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2003 Jan;284(1):H299-308. Epub 2002 Sep 26. Zhang X, Kim WS, Hatcher N, Potgieter K, Moroz LL, Gillette R, Sweedler JV. J Biol Chem. 2002 Dec 13;277(50):48472-8. Epub 2002 Oct 4. Espey MG, Thomas DD, Miranda KM, Wink DA. Proc Natl Acad Sci U S A. 2002 Aug 20;99(17):11127-32. Epub 2002 Aug 12. Weiss N, Zhang YY, Heydrick S, Bierl C, Loscalzo J.  Proc Natl Acad Sci U S A. 2001 Oct 23;98(22):12503-8. Epub 2001 Oct 16. Espey MG, Miranda KM, Thomas DD, Wink DA. J Biol Chem. 2001 Aug 10;276(32):30085-91. Epub 2001 Jun 12. Kuo RC, Baxter GT, Thompson SH, Stricker SA, Patton C, Bonaventura J, Epel D. Nature. 2000 Aug 10;406(6796):633-6. Nakatsubo N, Kojima H, Kikuchi K, Nagoshi H, Hirata Y, Maeda D, Imai Y, Irimura T, Nagano T. FEBS Letters,427,263-266, 1998. Kojima, H., Nakatsubo, N., Kikuchi, K., Kawahara, S., Kirino, Y.,Nagoshi,H., Hirata, Y., and Nagano, T. Anal. Chem. 70 2446-2453, 1998.

    • Diaminofluorescein-2 diacetate (DAF-2 DA)

      $30,000

      当ページに掲載している製品・サービスに関し、ご購入希望ならびご興味のある方は、こちらまでお問い合わせください。 型番 製品名 容量 希望小売価格(円) SK1002-01 Diaminofluorescein-2 diacetate (DAF-2 DA) 1mg ¥30,000 Diaminofluorescein-2 diacetate(DAF-2 DA)の特長 細胞膜透過性があり、組織や培養細胞中のNOをリアルタイムに観察できます。 細胞内に長時間局在化できます。 蛍光顕微鏡にて簡単に測定できます。 可視光励起なので、細胞にダメージを与えません。 高感度かつ特異的に測定できます。 測定原理 DAF-2 DAが細胞膜を透過し、細胞内のエステラーゼにより加水分解され、細胞膜を透過しにくいDAF-2になります。 DAF-2のアミノ基がNOと反応し、励起波長495nmで励起すると波長515nmの緑色の蛍光を発します。 内容 DAF-2 DA 1mg (in DMSO 0.45mL) C24H18N2O7 Mw:446.4 試薬の調製例 本品は約5mmol/Lになっております。 使用時に中性のバッファー等で500倍程度に希釈してお使いください。 参考文献 T.Uchida, Y.Sakashita, K. Kitahata, Y.Yamashita, C.Tomida, Y.Kimori, A.Komatsu, K.Hirasaka, A.Ohno, R.Nakao, A.Higashitani, A.Higashibata, N.Ishioka, T.Shimazu, T. Kobayashi, Y.Okumura, I.Choi, M.Oarada, E.M.Mills, S.Teshima-Kondo, S.Takeda, E. Tanaka, K.Tanaka, M.Sokabe, and T.Nikawa(2018) Am J Physiol Cell Physiol. In Press. リンク先:https://doi.org/10.1152/ajpcell.00184.2017 T. Tomita, A. Hirayama, H. Matsui, and K. Aoyagi (2017) Evid Based Complement Alternat Med in press Wang P, Du Y, Li Y, Ren D, Song CP. Plant Cell. 2010 Sep;22(9):2981-98. doi: 10.1105/tpc.109.072959. Epub 2010 Sep 24. Bryan NS, Grisham MB. Free Radic Biol Med. 2007 Sep 1;43(5):645-57. Epub 2007 Apr 29. Gao YJ, Lu C, Su LY, Sharma AM, Lee RM. Br J Pharmacol. 2007 Jun;151(3):323-31. Epub 2007 Mar 26. Iwakiri Y, Satoh A, Chatterjee S, Toomre DK, Chalouni CM, Fulton D, Groszmann RJ, Shah VH, Sessa WC. Proc Natl Acad Sci U S A. 2006 Dec 26;103(52):19777-82. Epub 2006 Dec 14. Yamamoto K, Sokabe T, Matsumoto T, Yoshimura K, Shibata M, Ohura N, Fukuda T, Sato T, Sekine K, Kato S, Isshiki M, Fujita T, Kobayashi M, Kawamura K, Masuda H, Kamiya A, Ando J. Nat Med. 2006 Jan;12(1):133-7. Epub 2005 Dec 4. Kadowaki H, Nishitoh H, Urano F, Sadamitsu C, Matsuzawa A, Takeda K, Masutani H, Yodoi J, Urano Y, Nagano T, Ichijo H. Cell Death Differ. 2005 Jan;12(1):19-24. Corpas FJ, Barroso JB, Carreras A, Quirós M, León AM, Romero-Puertas MC, Esteban FJ, Valderrama R, Palma JM, Sandalio LM, Gómez M, del Río LA. Plant Physiol. 2004 Sep;136(1):2722-33. Epub 2004 Sep 3. Lamotte O, Gould K, Lecourieux D, Sequeira-Legrand A, Lebrun-Garcia A, Durner J, Pugin A, Wendehenne D. Plant Physiol. 2004 May;135(1):516-29. Epub 2004 Apr 30. Huang X, Stettmaier K, Michel C, Hutzler P, Mueller MJ, Durner J. Planta. 2004 Apr;218(6):938-46. Epub 2004 Jan 10. Correa-Aragunde N, Graziano M, Lamattina L. Planta. 2004 Apr;218(6):900-5. Epub 2004 Jan 10. Tarpey MM, Wink DA, Grisham MB. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2004 Mar;286(3):R431-44. Neill, SJ; Desikan, R; Hancock, JT NEW PHYTOLOGIST 2003 Jul:159(1):11-35. Espey MG, Thomas DD, Miranda KM, Wink DA. Proc Natl Acad Sci U S A. 2002 Aug 20;99(17):11127-32. Epub 2002 Aug 12. Sakihama Y, Nakamura S, Yamasaki H. Plant Cell Physiol. 2002 Mar;43(3):290-7. Fulton D, Fontana J, Sowa G, Gratton JP, Lin M, Li KX, Michell B, Kemp BE, Rodman D, Sessa WC. J Biol Chem. 2002 Feb 8;277(6):4277-84. Epub 2001 Nov 29. Petroff MG, Kim SH, Pepe S, Dessy C, Marb?n E, Balligand JL, Sollott SJ. Nat Cell Biol. 2001 Oct;3(10):867-73. Montagnani M, Chen H, Barr VA, Quon MJ. J Biol Chem. 2001 Aug 10;276(32):30392-8. Epub 2001 Jun 11. Shintani S, Murohara T, Ikeda H, Ueno T, Sasaki K, Duan J, Imaizumi T. Circulation. 2001 Feb 13;103(6):897-903. Foissner I, Wendehenne D, Langebartels C, Durner J. Plant J. 2000 Sep;23(6):817-24. Kuo RC, Baxter GT, Thompson SH, Stricker SA, Patton C, Bonaventura J, Epel D. Nature. 2000 Aug 10;406(6796):633-6. Murohara T, Ikeda H, Duan J, Shintani S, Sasaki Ki, Eguchi H, Onitsuka I, Matsui K, Imaizumi T. J Clin Invest. 2000 Jun;105(11):1527-36. Lin S, Fagan KA, Li KX, Shaul PW, Cooper DM, Rodman DM. J Biol Chem. 2000 Jun 16;275(24):17979-85. Choi YB, Tenneti L, Le DA, Ortiz J, Bai G, Chen HS, Lipton SA. Nat Neurosci. 2000 Jan;3(1):15-21. Wingrove JA, O’Farrell PH. Cell. 1999 Jul 9;98(1):105-14. Kojima H, Nakatsubo N, Kikuchi K, Urano Y, Higuchi T, Tanaka J, Kudo Y, Nagano T. Neuroreport. 1998 Oct 26;9(15):3345-8. 小島宏建、長野哲雄、実験医学、Vol.17, No.8 946-950(1999) Kojima, H., Nakatsubo, N., Kikuchi, K., Kawahara, S., Kirino, Y.,Nagoshi,H., Hirata, Y., and Nagano, T. Anal. Chem.70 2446-2453, 1998. 長野哲雄、小島宏建:現代化学、9月号、No.342.23-30(1999) S. Kitajima, K. L. Lee, H. Hikasa, W. Sun, R. Y.-J. Huang, H. Yang, S. Matsunaga, T. Yamaguchi, M. Araki, H. Kato, L. Poellinger (2017) Oncotarget 8: 114481–114494 DOI: 10.18632/oncotarget.23010 T.Uchida, Y.Sakashita, K. Kitahata, Y. Yamashita, C.Tomida, Y.Kimori, A. Komatsu, K.Hirasaka, A. Ohno, R. Nakao, A.Higashitani, A.Higashibata, N.Ishioka, T. Shimazu, T. Kobayashi, Y. Okumura, I. Choi, M.Oarada, E. M. Mills, S.Teshima-Kondo, S. Takeda, E. Tanaka, K. Tanaka, M.Sokabe, and T.Nikawa (2018) Am J Physiol Cell Physiol. In Press.

    • Diaminofluorescein-FM (DAF-FM)

      $35,000

      当ページに掲載している製品・サービスに関し、ご購入希望ならびご興味のある方は、こちらまでお問い合わせください。 型番 製品名 容量 希望小売価格(円) SK1003-01 Diaminofluorescein-FM(DAF-FM) 1mg ¥35,000   Diaminofluorescein-FM (DAF-FM) の特長 酸性領域(pH6)でも高い蛍光強度が得られます。 組織や培養細胞が生成するNOをリアルタイムに観察できます。 可視光励起なので、生体成分由来の蛍光の影響が少なくてすみます。 可視光励起なので、細胞にダメージを与えません。 中性条件でNOを捉え蛍光を発するので、pHを変えずに測定できます。 高感度かつ特異的に測定できます。 測定原理 DAF-FMのアミノ基がNOと反応し、励起波長500nmで励起すると波長515nmの緑色の蛍光を発します。 内容 DAF-FM1mg (in DMSO 0.35 mL) C21H14F2N2O5       Mw:412.34 試薬の調製例 本品は約7mmol/Lになっております。 使用時に中性のバッファー等で1000倍程度に希釈してお使いください。 参考文献 Kiwamu Hyodo, Kenji Hashimoto, Kazuyuki Kuchitsu, Nobuhiro Suzuki, Tetsuro Okuno Proc Natl Acad Sci USA 2017 114(7):E1282-E1290. doi:10.1073/pnas.1610212114 Singh R, Manjunatha U, Boshoff HI, Ha YH, Niyomrattanakit P, Ledwidge R, Dowd CS, Lee IY, Kim P, Zhang L, Kang S, Keller TH, Jiricek J, Barry CE 3rd. Science. 2008 Nov 28;322(5906):1392-5. doi: 10.1126/science.1164571. Jan-Zhong Sheng, Dianna Wang, Andrew P. Braun (2007) J Pharmacol Exp Ther. 315(2):931-940. Sheng JZ, Braun AP. Am J Physiol Cell Physiol. 2007 Jul;293(1):C458-67. Epub 2007 Apr 25. Sarath G, Bethke PC, Jones R, Baird LM, Hou G, Mitchell RB. Planta. 2006 May;223(6):1154-64. Epub 2005 Dec 21. Ziegelstein RC, Xiong Y, He C, Hu Q. Biochem Biophys Res Commun. 2006 Mar 31;342(1):153-63. Epub 2006 Feb 3. Balcerczyk A, Soszynski M, Bartosz G. Free Radic Biol Med. 2005 Aug 1;39(3):327-35. Epub 2005 Apr 9. Mabuchi T, Shintani N, Matsumura S, Okuda-Ashitaka E, Hashimoto H, Muratani T, Minami T, Baba A, Ito S. J Neurosci. 2004 Aug 18;24(33):7283-91. Bethke PC, Badger MR, Jones RL. Plant Cell. 2004 Feb;16(2):332-41. Epub 2004 Jan 23. Kuebler WM, Uhlig U, Goldmann T, Schael G, Kerem A, Exner K, Martin C, Vollmer E, Uhlig S. Am J Respir Crit Care Med. 2003 Dec 1;168(11):1391-8. Epub 2003 Aug 28. Zhang C, Czymmek KJ, Shapiro AD. Mol Plant Microbe Interact. 2003 Nov;16(11):962-72. Rizzo MA, Piston DW. J Cell Biol. 2003 Apr 28;161(2):243-8. Epub 2003 Apr 21. Itoh Y, Ma FH, Hoshi H, Oka M, Noda K, Ukai Y, Kojima H, Nagano T, Toda N. Anal Biochem. 2000 Dec 15;287(2):203-9. Kojima H, Hirata M, Kikuchi K, Kudo Y, Nagano T  Journal of Neurochemistry,2001; 76: 1404-1410 Kojima H, Urano Y, Kikuchi K, Higuchi T, Hirata Y, Nagano T Angew Chem Int Ed 1999; 38: 3209-3212

    • Diaminofluorescein-FM diacetate (DAF-FM DA)

      $35,000

      当ページに掲載している製品・サービスに関し、ご購入希望ならびご興味のある方は、こちらまでお問い合わせください。 型番 製品名 容量 希望小売価格(円) SK1004-01 Diaminofluorescein-FM diacetate (DAF-FM DA) 1mg ¥35,000 Diaminofluorescein-FM diacetate (DAF-FM DA) の特長 酸性領域(pH6)でも高い蛍光強度が得られます。 細胞膜透過性があり、組織や培養細胞中のNOをリアルタイムに観察できます。 細胞内に長時間局在化できます。 蛍光顕微鏡にて簡単に測定できます。 可視光励起なので、細胞にダメージを与えません。 高感度かつ特異的に測定できます。 測定原理 DAF-FM DAが細胞膜を透過し、細胞内のエステラーゼにより加水分解され、細胞膜を透過しにくいDAF-FMになります。 DAF-FMのアミノ基がNOと反応し、励起波長500nmで励起すると波長515nmの緑色の蛍光を発します。 内容 DAF-FM DA 1mg (in DMSO 0.4 mL) C25H18F2N2O7             Mw:496.42 試薬の調製例 本品は約5mmol/Lになっております。 使用時に中性のバッファー等で500倍程度に希釈してお使いください。 参考文献 E. S. Choi, J. J. Yoon, B. H. Han, D.H. Jeong, Y. J. Lee, D. G. Kang, H. S. Lee. (2018) Phytomedicine. 38:12-23 DOI: 10.1016/j.phymed.2017.09.022 M. Ando, T. Matsumoto, K. Taguchi, T. Kobayashi (2017) Free Radical Biology and Medicine 112:553-566, DOI:10.1016/j.freeradbiomed.2017.08.027 R. Furuta, N. Kurake, K. Ishikawa, K. Takeda, H. Hashizume, H. Tanaka, H. Kondo, M. Sekine, M. Hori (2017) Plasma Processes and Polymers, DOI: 10.1002/ppap.201700123 Kiwamu Hyodo, Kenji Hashimoto, Kazuyuki Kuchitsu, Nobuhiro Suzuki,Tetsuro Okuno (2017) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 114: E1282–E1290, DOI: 10.1073/pnas.1610212114 Chen C, Jiang J, Lü JM, Chai H, Wang X, Lin PH, Yao Q. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2010 Jul;299(1):H193-201. doi: 10.1152/ajpheart.00431.2009. Epub 2010 Apr 30. Chen C, Chai H, Wang X, Jiang J, Jamaluddin MS, Liao D, Zhang Y, Wang H, Bharadwaj U, Zhang S, Li M, Lin P, Yao Q. Blood. 2008 Oct 15;112(8):3205-16. doi: 10.1182/blood-2008-03-143479. Epub 2008 Jul 24. Keitel V, Reinehr R, Gatsios P, Rupprecht C, Görg B, Selbach O, Häussinger D, Kubitz R. Hepatology. 2007 Mar;45(3):695-704. Barraud N, Hassett DJ, Hwang SH, Rice SA, Kjelleberg S, Webb JS. J Bacteriol. 2006 Nov;188(21):7344-53. Sarath G, Bethke PC, Jones R, Baird LM, Hou G, Mitchell RB. Planta. 2006 May;223(6):1154-64. Epub 2005 Dec 21. Balcerczyk A, Soszynski M, Bartosz G. Free Radic Biol Med. 2005 Aug 1;39(3):327-35. Epub 2005 Apr 9. Davidson SK, Koropatnick TA, Kossmehl R, Sycuro L, McFall-Ngai MJ. Cell Microbiol. 2004 Dec;6(12):1139-51. Patzak A, Lai EY, Mrowka R, Steege A, Persson PB, Persson AE. Kidney Int. 2004 Nov;66(5):1949-58. Zeidler D, Zähringer U, Gerber I, Dubery I, Hartung T, Bors W, Hutzler P, Durner J. Proc Natl Acad Sci U S A. 2004 Nov 2;101(44):15811-6. Epub 2004 Oct 21. Li N, Sul JY, Haydon PG. J Neurosci. 2003 Nov 12;23(32):10302-10. Zhang C, Czymmek KJ, Shapiro AD. Mol Plant Microbe Interact. 2003 Nov;16(11):962-72. Mabuchi T, Matsumura S, Okuda-Ashitaka E, Kitano T, Kojima H, Nagano T, Minami T, Ito S. Eur J Neurosci. 2003 Apr;17(7):1384-92. Leckie C, Empson R, Becchetti A, Thomas J, Galione A, Whitaker M. J Biol Chem. 2003 Apr 4;278(14):12247-54. Epub 2003 Jan 22. Itoh Y, Ma FH, Hoshi H, Oka M, Noda K, Ukai Y, Kojima H, Nagano T, Toda N. Anal Biochem. 2000 Dec 15;287(2):203-9. Kojima H, Hirata M, Kikuchi K, Kudo Y, Nagano T Journal of Neurochemistry,2001; 76: 1404-1410 Kojima H, Urano Y, Kikuchi K, Higuchi T, Hirata Y, Nagano T Angew Chem Int Ed 1999; 38: 3209-3212

    • Diaminorhodamine-4M (DAR-4M)

      $35,000

      当ページに掲載している製品・サービスに関し、ご購入希望ならびご興味のある方は、こちらまでお問い合わせください。 型番 製品名 容量 希望小売価格(円) SK1005-01 Diaminorhodamine-4M(DAR-4M 1mg ¥35,000   Diaminorhodamine-4M (DAR-4M) の特長 組織や培養細胞が生成するNOをリアルタイムに観察できます。 長波長で励起でき、細胞の自家発光領域とは、ほとんど重なりません。 pH4~pH12において蛍光の減弱がほとんどありません。 測定原理 DiaminorhodamineがNOと反応し、励起波長560nmで励起すると波長575nmのオレンジ色の蛍光を発します。 内容 DAR-4M  1mg (in DMSO 0.47 mL) C25H26N4O3        Mw:430.50 試薬の調製例 本品は約5mmol/Lになっております。 使用時に中性のバッファー等で500倍程度に希釈してお使いください。 参考文献 Nagano T. J Clin Biochem Nutr. 2009 Sep;45(2):111-24. doi: 10.3164/jcbn.R09-66. Epub 2009 Aug 28. Steinert JR, Kopp-Scheinpflug C, Baker C, Challiss RA, Mistry R, Haustein MD, Griffin SJ, Tong H, Graham BP, Forsythe ID. Neuron. 2008 Nov 26;60(4):642-56. doi: 10.1016/j.neuron.2008.08.025. Flores T, Todd CD, Tovar-Mendez A, Dhanoa PK, Correa-Aragunde N, Hoyos ME, Brownfield DM, Mullen RT, Lamattina L, Polacco JC. Plant Physiol. 2008 Aug;147(4):1936-46. doi: 10.1104/pp.108.121459. Epub 2008 Jun 20. Ye X, Rubakhin SS, Sweedler JV. Analyst. 2008 Apr;133(4):423-33. doi: 10.1039/b716174c. Epub 2008 Feb 7. Miller EW, Chang CJ. Curr Opin Chem Biol. 2007 Dec;11(6):620-5. Epub 2007 Nov 9. Tun NN, Santa-Catarina C, Begum T, Silveira V, Handro W, Floh EI, Scherer GF. Plant Cell Physiol. 2006 Mar;47(3):346-54. Epub 2006 Jan 13. Kojima, H., Hirotani, M., Nakatsubo, N., Kikuchi, K., Urano, Y., Higuchi, T., Hirata, Y., Nagano, T. Anal. Chem. 2001; 73: 1967-1973

    • Diaminorhodamine-4M acetoxymethyl ester (DAR-4M AM)

      $40,000

      当ページに掲載している製品・サービスに関し、ご購入希望ならびご興味のある方は、こちらまでお問い合わせください。 型番 製品名 容量 希望小売価格(円) SK1006-01 Diaminorhodamine-4M acetoxymethyl ester(DAR-4M AM) 1mg ¥40,000   Diaminorhodamine-4M acetoxymethyl ester (DAR-4M AM) の特長 細胞膜透過性があり、組織や培養細胞中のNOをリアルタイムに観察できます。 長波長で励起でき、細胞の自家発光領域とは、ほとんど重なりません。 pH4~pH12において蛍光の減弱がほとんどありません。 測定原理 DiaminorhodamineがNOと反応し、励起波長560nmで励起すると波長575nmのオレンジ色の蛍光を発します。 内容 DAR-4M AM1mg (in DMSO 0.32 mL) C28H31IN4O5            Mw:630.47 試薬の調製例 本品は約5mmol/Lになっております。 使用時に中性のバッファー等で500倍程度に希釈してお使いください。 参考文献 Nobuko Gan, Tsuyoshi Hondou, Hidetake Miyata (2012) Biological and Pharmaceutical Bulletin 35(9):1454-1459 Corpas FJ, Hayashi M, Mano S, Nishimura M, Barroso JB. Plant Physiol. 2009 Dec;151(4):2083-94. doi: 10.1104/pp.109.146100. Epub 2009 Sep 25. Nagano T. J Clin Biochem Nutr. 2009 Sep;45(2):111-24. doi: 10.3164/jcbn.R09-66. Epub 2009 Aug 28. Steinert JR, Kopp-Scheinpflug C, Baker C, Challiss RA, Mistry R, Haustein MD, Griffin SJ, Tong H, Graham BP, Forsythe ID. Neuron. 2008 Nov 26;60(4):642-56. doi: 10.1016/j.neuron.2008.08.025. Vatsa A, Breuls RG, Semeins CM, Salmon PL, Smit TH, Klein-Nulend J. Bone. 2008 Sep;43(3):452-8. doi: 10.1016/j.bone.2008.01.030. Epub 2008 Feb 21. Ye X, Rubakhin SS, Sweedler JV. Analyst. 2008 Apr;133(4):423-33. doi: 10.1039/b716174c. Epub 2008 Feb 7. Lepiller S1, Laurens V, Bouchot A, Herbomel P, Solary E, Chluba J. Free Radic Biol Med. 2007 Aug 15;43(4):619-27. Epub 2007 May 31. Vatsa A, Mizuno D, Smit TH, Schmidt CF, MacKintosh FC, Klein-Nulend J. J Bone Miner Res. 2006 Nov;21(11):1722-8. Tun NN, Santa-Catarina C, Begum T, Silveira V, Handro W, Floh EI, Scherer GF. Plant Cell Physiol. 2006 Mar;47(3):346-54. Epub 2006 Jan 13. Vecchione C, Aretini A, Marino G, Bettarini U, Poulet R, Maffei A, Sbroggiò M, Pastore L, Gentile MT, Notte A, Iorio L, Hirsch E, Tarone G, Lembo G. Circ Res. 2006 Feb 3;98(2):218-25. Epub 2005 Dec 15. Núñez C1, Víctor VM, Tur R, Alvarez-Barrientos A, Moncada S, Esplugues JV, D’Ocón P. Circ Res. 2005 Nov 11;97(10):1063-9. Epub 2005 Oct 13. Satoh M, Fujimoto S, Haruna Y, Arakawa S, Horike H, Komai N, Sasaki T, Tsujioka K, Makino H, Kashihara N. Am J Physiol Renal Physiol. 2005 Jun;288(6):F1144-52. Epub 2005 Feb 1. Kojima, H., Hirotani, M., Nakatsubo, N., Kikuchi, K., Urano, Y., Higuchi, T., Hirata, Y., Nagano, T. Anal. Chem. 2001; 73: 1967-1973

    • EP-HMRG

      $49,800

      当ページに掲載している製品・サービスに関し、ご購入希望ならびご興味のある方は、こちらまでお問い合わせください。 型番 製品名 容量 希望小売価格(円) GC 811 EP-HMRG 30 nmol x 5 ¥ 49,800

    • Fatty acid uptake probe

      $0$141,000

      当ページに掲載している製品・サービスに関し、ご購入希望ならびご興味のある方は、こちらまでお問い合わせください。 Fatty acid cellular uptake assay. Cleavable luciferin technology to monitor and quantify fatty acid uptake in vivo Application in new drug screening, evaluating new treatment approaches and investigation of fundamental biological processes Use in cells and live animals expressing luciferase   Product Description Fatty acid uptake probe Average use: 0.01 mg per mouse Probe description   Reproduced from ACS Chem. Biol., 2012, 7(11), 1884-1891. Copyright 2012 American Chemical Society. Ventral luminescent / photographic overlay comparing the BLI of FFA-SS-luc (right) and the control FFA-S-luc (left) 20 min postgavage.

    • FeRhoNox™-1

      $49,800

      当ページに掲載している製品・サービスに関し、ご購入希望ならびご興味のある方は、こちらまでお問い合わせください。 型番 製品名 容量 希望小売価格(円 ) GC 901 FeRhoNox™-1 50μg×10 ¥49,800   ~他の金属イオンと区別してFe2+の検出が可能に~ 他の金属イオンと区別して鉄(II)イオンを特異的に検出可能 遊離鉄(II)イオンの生細胞イメージングが可能 FeRhoNox™-1は、鉄(II)イオンを検出可能なゴルジ局在性の生細胞イメージング用蛍光プローブです。他の金属イオンと区別してFe2+を特異的に検出することができます。ゴルジでのFe2+ の検出に有効です。 用途 水溶液中での鉄(II)イオンの検出に。 生細胞での遊離鉄(II)イオンの検出に FeRhoNox™-1 の特長 λabs 540 nm(excitation) λFl 575 nm(emission) 図1. FeRhoNox™-1がFe2+により還元を受け、蛍光を発する仕組み。 図2. Fe2+反応前後のFeRhoNox™-1の蛍光スペクトル FeRhoNox™-1とFe2+を37℃、1時間反応させた。Fe2+を反応させると、575 nmをピークに蛍光強度上昇を示した。 図3. HepG2細胞での鉄イオンの検出 HepG2 細胞に対して Fe(NH4)2(SO4)2 (FAS; 100 μM) を加えて、30 min インキュベートした後、5 μM の FeRhoNox™-1 を加えてさらにインキュベート。1 h 後、蛍光顕微鏡観察。   図4. 鉄(II)イオンに対するFeRhoNox™-1の応答性。 鉄(II)イオンを加える事で応答の上昇が観察される。 図5. FeRhoNox™-1 鉄(II)イオンに対する選択性。 鉄(II)イオンのみに選択的に反応している。   図6. HepG2細胞でのGolgi MarkerとFeRhoNox™-1との蛍光イメージング像の比較。 Mergeによって、FeRhoNox™-1はGolgi体内の鉄(II)イオンを選択的に検出している事がわかる。 HepG2細胞への応用 図7. FeRhoNox™-1を用いたHepG2細胞でのライブセルイメージング。 ①-Fe(II):鉄イオン(100μM Ferrous ammonium sulfate)を加えていない場合、②+Fe(II):鉄イオンを加えた場合、③+Fe(II)+Bpy:鉄(II)キレーターであるBpyを添加した場合。②+Fe(II)でFeRhoNox™-1は蛍光強度の上昇を示した。また、③で蛍光強度が減少している事から、選択的に鉄(II)イオンを検出している事を示している。 HEK293細胞への応用 図8. FeRhoNox™-1を用いたHEK293細胞でのライブセルイメージング。 ①-Fe(II):鉄イオンを加えていない場合、②+Fe(II):鉄イオンを加えた場合、③+Fe(II)+Bpy:Bpyを添加した場合。②+Fe(II)でFeRhoNox™-1は蛍光強度の上昇を示している事から、ライブセル中においてFe(II)を検出している。また、③+Fe(II)+Bpy蛍光強度が減少している事から、選択的に鉄(II)イオンを検出している事を示している。 細胞内の内在性鉄(II)イオンの検出 図9. 細胞内内在性鉄(II)イオンの検出。 ②Bpy添加によりシグナルが減少している事からFeRhoNox™-1により内在性鉄(II)が検出されている事がわかる。 *Bpy: 2,20-bipyridyl (Bpy)は細胞膜透過性の鉄(II)イオン選択的キレーターです。 観察方法 励起波長は 緑色光(G励起・546nm) が適しています(フィルタは、 G-1A (Nikon 社) もしくはU-FGW (Olympus 社)、N2.1 (Leica 社) 等が使用可能)。染色は5 μM FeRhoNox™-1をライブセルと共に37℃、1時間インキュベート後、バッファ洗浄にて観察頂けます。蛍光波長は 575 nm をピークに検出されます。 参考文献 Y.Kamihara,K.Takada, T.Sato, Y.Kawano, K.Murase, Y.Arihara, S.Kikuch, N.Hayasaka, M.Usami, S.Iyama, K.Miyanishi, Y.Sato, M.Kobune, J.Kato(2016) Oncotarget.7: 64330–64341.DOI: 10.18632/oncotarget.11830 リンク先: https://doi.org/10.18632/oncotarget.11830 K. Chaudhary, W. Promsote, S. Ananth, R. Veeranan-Karmegam, A. Tawfik, P. Arjunan, P. Martin, S. B. Smith, M. Thangaraju, O. Kisselev, V. Ganapathy, J. Gnana-Prakasam (2018) Sci Rep., 8:3025 DOI: 10.1038/s41598-018-21276-2 A. T. Aron, A. G. Reeves, C. J. Chang. (2018) Curr Opin Chem Biol. 43:113-118 DOI: 10.1016/j.cbpa.2017.12.010 K. Oshima, Y. Ikeda, Y. Horinouchi, H. Watanabe, H. Hamano, Y. Kihira, S. Kishi, Y. Izawa-Ishizawa, L. Miyamoto, T. Hirayama, H. Nagasawa, K. Ishizawa, K. Tsuchiya, T. Tamaki (2017) Lab. Invest. 97: 555-566 DOI: 10.1038/labinvest.2017.11 DeGregorio-Rocasolano N, Martí-Sistac O, Ponce J, Castelló-Ruiz M, Millán M, Guirao V, García-Yébenes I, Salom JB, Ramos-Cabrer P, Alborch E, Lizasoain I, Castillo J, Dávalos A, Gasull T. (2017) Redox Biol. 15:143-158. DOI: 10.1016/j.redox.2017.11.026 Fumiya Ito , Takahiro Nishiyama, Lei Shi , Masahiko Mori, Tasuku Hirayama ,Hideko Nagasawa, Hiroyuki Yasui, Shinya Toyokuni ,(2016) Biochem Biophys Res Commun. 476: 600-606 Epalrestat Upregulates Heme Oxygenase-1, Superoxide Dismutase, and Catalase in Cells of the Nervous System. Yama K, Sato K, Murao Y, Tatsunami R, Tampo Y. Biol Pharm Bull. 2016 39(9):1523-30. doi: 10.1248/bpb.b16-00332 Cancer Sci. 2015 Dec 17. doi: 10.1111/cas.12865. Role of hemoglobin and transferrin in multi-wall carbon nanotube-induced mesothelial injury and carcinogenesis. Wang Y, Okazaki Y, Shi L, Kohda H, Tanaka M, Taki K, Nishioka T, Hirayama T, Nagasawa H, Yamashita Y, Toyokuni S.FeRhoNox-1の応用例 Mukaide, T.; Hattori, Y.; Misawa, N.; Funahashi, S.; Jiang, L.; Hirayama, T.; Nagasawa, H.; Toyokuni, S. Free Radic. Res. 2014, 48, 990-995. FeRhoNox™-1 は、論文中のRhoNox-1の事です。 Tomoyo Imamura, Tasuku Hirayama, Kazuhiro Tsuruma, Masamitsu Shimazawa, Hideko Nagasawa, and Hideaki Hara, Volume 129, December 2014, Pages24-30, Experimental Eye Research “Hydroxyl radicals cause fluctuation in intracellular ferrous ion levels upon light exposure during photoreceptor cell death” Hirayama, T.; Okuda, K.; Nagasawa, H. Chem. Sci. 2013, 4, 1250-1256. Y.Kamihara,K.Takada, T.Sato, Y.Kawano, K.Murase, Y.Arihara, S.Kikuch, N.Hayasaka, M.Usami, S.Iyama, K.Miyanishi, Y.Sato, M.Kobune, J.Kato(2016) Oncotarget.7: 64330–64341.DOI: 10.18632/oncotarget.11830

    • Firefly Luciferin

      $68,000

      当ページに掲載している製品・サービスに関し、ご購入希望ならびご興味のある方は、こちらまでお問い合わせください。 型番 製品名 容量 希望小売価格(円) RS101-01 D-Luciferin potassium salt (Standard Purity) 1g 68,000   Content and storage Material Amount Storage Stability Firefly Luciferin 1 g -20 °C Desiccate Protect from light When stored as directed, reactive probes are stable for at least 6 months 5 g 1 g is enough for 300 mice General Specifications Color:  Light yellow powder  Detection Method: Bioluminescence Excitation Class: Visible  Molecular Weight: 280.32 g.mol-1 Formula: C11H8N2O3S2 Cas Number: 2591-17-5  Shipping Condition: Dry Ice  Regulatory Statement: For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures   Description Luciferin is a small molecule that consists of a benzothiazole moiety attached to a thiazole carboxylic acid moiety. Luciferin is a natural substrate of luciferase, an enzyme found in Firefly luciferase. This molecule has fluorescent properties (Ex 328 nm; Em 532 nm in H2O)1,2 but it is mainly used for bioluminescent imaging (BLI) purpose. Bioluminescence is a natural process that has been found in various living organisms such as the North American firefly (Photinus pyralis) and is based on the oxidation of D-luciferin catalyzed by the enzyme Luciferase. Upon recognition by the enzyme, D-luciferin is oxidized to oxy-luciferin and releasing one photon of light, which can be detected by a CCD camera (Figure 1). The intensity of the light output is closely related to the amount of D-luciferin available for the enzyme and therefore it is possible to quantify the amount of luciferin by measuring the amount of emitted light with a CCD camera. As a non-invasive imaging method, BLI is comparable to other in vitro and in vivo techniques but has the advantage of high sensitivity, convenience and ease of use. It does not require a light source (as opposed to fluorescence) and there is no background signal from tissues that do not express luciferase. Moreover, it allows real-time imaging of luciferase expressing cells or luciferase expressing mice.3-5 The luciferin/Luciferase process is very substrate dependent and does not allow significant modification on the luciferin scaffold to be recognized by the enzyme. Figure 1: Oxydation of D-luciferin by Firefly luciferase forming oxy-luciferin and a photon of light   Guideline for use D-luciferin for in vitro use: – 1g of D-luciferin is dissolved in 33.3 mL of sterile water to make a 30 mg/mL stock solution. After mixing and filtering (0.2 um), the solution is aliquoted and purged with nitrogen (inert gas prevents oxidation) protect from light and freeze down to -80°C for future use. Frozen stock solutions can be stored up to 1 year. – D-luciferin stock solution is thawed, kept on ice and protected from light. Stock solution is diluted at 1:200 in complete culture medium to 150 ug/mL. Luciferase expressing cells are incubated 5 min at 37°C prior to imaging. Diluted solution should be discarded after use.   D-luciferin for in vivo use: – 1g of D-luciferin is dissolved in 66.6 mL of DPBS, w/o Mg2+ and Ca2+ to make a 15mg/mL solution. After mixing and filtering, the solution is aliquoted and purged with nitrogen (inert gas prevents oxidation) protect from light and freeze down to -80°C for future use. Frozen stock solution can be stored up to 1 year. – D-luciferin solution is thawed, kept on ice and protected from light. Diluted solution should be discarded after use – Mouse is injected IP with D-luciferin solution at 150mg/kg of body weight. Images are acquired after 10-15 min post-injection.   Reference 1. White, E.H. et al.,(1963) J. Am. Chem. Soc., 85, 337 2. Bowie, L.J., (1978) Methods in Enzymology, 57, 23 3. Prescher, J. A., and Contag, C. H. (2010) Curr. Opin. Chem. Biol. 14, 80-89. 4. McCaffrey, A., Kay, M. A., and Contag, C. H. (2003) Mol. Imaging 2, 75-86 5. Massoud, T. F., and Gambhir, S. S. (2003) Genes Dev. 17, 545-580.

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